校準(zhǔn)
核酸蛋白濃度測(cè)定儀是確保其測(cè)量準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵步驟。以下是校準(zhǔn)核酸蛋白濃度測(cè)定儀的一般步驟:
1. 準(zhǔn)備工作:
- 確保儀器處于良好的工作狀態(tài),包括電源、顯示屏、按鍵等部件正常運(yùn)作。
- 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品溶液,用于校準(zhǔn)儀器。這些標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)該是已知濃度的核酸或蛋白質(zhì)溶液,并且濃度范圍應(yīng)覆蓋待測(cè)樣品的預(yù)期濃度范圍。
- 清潔比色杯或樣品池,確保無(wú)殘留物或污染物。
2. 開(kāi)機(jī)預(yù)熱:
- 打開(kāi)儀器電源,讓儀器預(yù)熱一段時(shí)間(通常為15-30分鐘),以確保光源穩(wěn)定。
3. 設(shè)置參數(shù):
- 根據(jù)需要選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)模式(如吸光度模式、熒光模式等)。
- 設(shè)置測(cè)試參數(shù),如波長(zhǎng)、增益、時(shí)間常數(shù)等。
4. 進(jìn)行基線校正:
- 使用空白溶液(如純水或緩沖液)進(jìn)行基線校正,以消除背景噪聲和漂移。將空白溶液放入比色杯中,放入樣品池,然后按下“基線”或“調(diào)零”按鈕,等待儀器自動(dòng)完成基線校正。
5. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作:
- 使用一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,按照從低到高的順序進(jìn)行測(cè)試。記錄每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液的吸光度或熒光強(qiáng)度值。
- 以標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為橫坐標(biāo),吸光度或熒光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線??梢允褂镁€性回歸或其他合適的方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。
6. 驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)曲線:
- 使用另一個(gè)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行驗(yàn)證,確保其濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。將該標(biāo)準(zhǔn)品溶液放入比色杯中,放入樣品池,然后讀取其吸光度或熒光強(qiáng)度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算該標(biāo)準(zhǔn)品溶液的預(yù)測(cè)濃度,并與實(shí)際濃度進(jìn)行比較,計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。如果回收率在90%-110%之間,且RSD小于5%,則認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)曲線可靠。
7. 樣品測(cè)試:
- 將待測(cè)樣品溶液放入比色杯中,放入樣品池,然后讀取其吸光度或熒光強(qiáng)度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品的濃度。
8. 定期校準(zhǔn):
- 為了保持儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,建議定期進(jìn)行校準(zhǔn)??梢愿鶕?jù)實(shí)際情況制定校準(zhǔn)計(jì)劃,如每周、每月或每季度進(jìn)行一次校準(zhǔn)。
通過(guò)以上步驟,可以有效地校準(zhǔn)核酸蛋白濃度測(cè)定儀,確保其測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。